SDS-PAGE凝胶电泳技术
SDS-PAGE凝胶电泳,即聚丙(bǐng )烯酰胺凝胶电泳,是生物化学和分(fèn )子生物学实验(yàn )中常用(🥙)的蛋(🖲)白质(zhì )分离和鉴(jiàn )定技术,这项技术的基本原理是利用蛋白质在电场中的(de )迁移率与其分子量成反比的关系,通过添加阴离子(zǐ )洗涤(dí )剂SDS(十二烷基硫(liú )酸(suān )钠)使(🧡)蛋白质带上(shàng )负电(diàn )荷,从而消除了蛋白质原(🍊)有的电(diàn )荷差异,使得蛋白质(🕰)的迁移(yí )仅受其大(dà )小的影响。
操作步骤方面,首先需要制备适当(dāng )浓度和pH值(📷)的聚丙(bǐng )烯酰胺凝胶,然(rá(💡)n )后将含有SDS和(⭕)还(hái )原(😳)(yuán )剂的蛋白质样品加(jiā )入(🛢)(rù )凝胶孔中,通电(diàn )后,蛋(dàn )白质开始根据大小(xiǎo )分离,小分子蛋白(🔊)质移动得更快,而(ér )大分子(zǐ(🛷) )蛋白质则较慢(màn ),通过染色或西方印迹(jì )等方法可以检测和分析蛋白质。
应用范围广泛,SDS-PAGE不仅用于蛋白质分子量的(de )测定,还广泛应用(💉)于蛋白质(zhì )纯(💝)化程度的分析、蛋白质变性和复性(💐)研究以及蛋白质-蛋白质相互作用的研(yán )究,它也是研究蛋白质翻译后修(🗼)饰(💊)的重要工具。
尽(🤙)管SDS-PAGE是(shì )一(💲)种强大的分(💹)析工(gōng )具,但它也有局限性,对于极(jí )端大小的(de )蛋白质,分辨率可能会降低;某(mǒu )些蛋白质可(👾)能因为(wéi )结(⤵)构的特(tè )殊性而在凝胶中的(de )迁移不符合预期,在(🎤)进(jìn )行SDS-PAGE分析(xī )时,通常需要结合其他生(shēng )化和分子生物学技术以获得更准确的结果。
视频本站于2024-10-29 07:10:02收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。