SDS-PAGE凝胶电泳技术(shù )
SDS-PAGE凝胶(jiāo )电泳,即聚丙烯酰胺凝胶电(diàn )泳,是(shì )生物(🚓)化学和分(🔲)子生物学(📸)实(🚏)验中常用的(⌛)蛋白质分离(lí )和鉴定技术,这项技术的基本原理是利用蛋白质在电场中的迁移率与其(qí )分子量成反(fǎn )比的关系,通(👂)过添加阴离子(zǐ )洗涤剂SDS(十(shí )二烷基硫酸(suān )钠(nà ))使蛋(dàn )白质(zhì )带上负电荷(🚘),从而消除了蛋白(bái )质原有的电荷差异(yì ),使得蛋白质的迁移仅受其(🅾)大小的影响。
操作步骤方面,首先需要制备适当浓(🍇)度和pH值的(de )聚丙烯酰胺凝(níng )胶,然后将含(🗼)有(👀)SDS和(hé )还原(🌜)剂的蛋白质样品(pǐn )加入凝胶孔中,通电后(🔬),蛋白质开始(📘)根据大小(⛏)分离,小分子蛋白质移动得更快,而大分子蛋(✉)白质则较慢,通过染色或西方(🤨)印迹等方法可以(✂)检测和分析蛋白质。
应用(yòng )范围广泛,SDS-PAGE不(🍑)仅用于(yú )蛋白质分子量的测定,还广泛应用于(🏨)蛋白质纯化程(chéng )度(dù )的(de )分(fèn )析、蛋白质变性和复性研(yán )究(jiū )以(🏾)及蛋白质-蛋白质(🦕)相互作用(yòng )的研究(jiū ),它也是研究蛋(dàn )白质翻译(🐽)后修饰的(de )重要(yào )工具。
尽管SDS-PAGE是一(yī )种(♑)强大(dà )的分析(xī )工具,但它也有局限性,对于极端大小的蛋白质,分辨(🧣)率可能会(huì )降低;某些蛋白质可能因为结构的特(tè(💑) )殊性(xì(🤡)ng )而在凝胶中的迁移不符合预期,在进行SDS-PAGE分析(xī )时,通常需要结合其他生化和分子生物学技术以获(huò )得更准确的结果。
视频本站于2024-11-02 10:11:50收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。