SDS-PAGE凝胶电泳技术
SDS-PAGE凝胶电泳(⚾),即聚丙烯(xī )酰胺凝胶电泳,是生物化(🤮)学和分子生物(🚤)学实验中常用的蛋白质分离(lí )和鉴定技术,这项技(jì )术的基本原理(🌽)是利用蛋白(bái )质(zhì )在(zài )电场中的(de )迁移率与其分子量成反(fǎn )比的关系,通过添加(jiā )阴离(lí )子洗涤剂SDS(十二烷基硫(🛫)酸钠)使蛋白质(zhì )带上(shàng )负电荷,从而消除(🚇)了蛋白(bái )质原有的电荷差异,使得蛋白质的迁移仅受其大小的影(yǐng )响。
操作步骤方面,首先需要制备适当浓度和pH值的(de )聚丙烯酰胺凝胶,然后将(🥏)含有SDS和还(hái )原剂的蛋白(🤒)质样品加入凝(🌕)胶孔中,通电后,蛋白质开始根据大小分离,小分(🔘)子蛋白质移(😲)动得更快,而大分子蛋白质则较慢,通过(guò )染色或西方印迹等方法可(🔖)以检测和分析蛋白(🏕)质(zhì )。
应用范(fàn )围(wéi )广泛,SDS-PAGE不(bú )仅用于蛋白质分子量的测定,还广泛应用于(yú )蛋白质纯化程度的分析、蛋(dàn )白质变性和复性(🎩)研究以及蛋白质-蛋白质相互作用(yòng )的(de )研究,它也是(shì )研究蛋(dàn )白质翻译(📞)(yì )后修饰的重要工具。
尽(🍹)管(🔂)SDS-PAGE是一种强大的分(fèn )析工具,但它也有局限性,对(💸)于极端大小的蛋白(🎨)质,分(fèn )辨率(lǜ )可能会降低(🥁);某些蛋白质可能因(yīn )为结构的特殊(shū )性而在凝胶(jiāo )中的迁移不符合预期,在进(jìn )行SDS-PAGE分析时,通常(cháng )需(xū )要结合其他生化和分子生物学技术以获(huò )得更(💬)准确(què )的结果。
视频本站于2024-10-28 03:10:12收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。