SDS-PAGE凝胶电泳技(jì )术
SDS-PAGE凝胶电泳,即聚丙烯酰胺凝胶电泳,是生物化学和(🦏)分子生物学(xué )实验中常用的蛋(dàn )白质分(fèn )离和鉴(jiàn )定技术,这(🛒)项(🥛)技术(shù )的基本原理是利(lì )用蛋白质在电场中的迁移率与其分子量成(🕢)反比的关系,通过添加阴离子洗涤剂SDS(十二烷基硫(liú )酸钠(🧦))(🤢)使蛋白质带上负(🕷)电荷,从而消除了(le )蛋白质(🔉)原有的(de )电荷差异,使(shǐ )得(dé )蛋白质(zhì )的迁移(🎱)仅(jǐn )受(🛑)其大小的影响。
操作(zuò )步骤方面,首先需要制备适当浓度和pH值的聚(jù )丙烯酰(xiān )胺凝胶(jiāo ),然后将含有SDS和还(🌉)原(🍁)(yuán )剂的蛋(dàn )白质(📟)样品加入(🔍)凝胶孔中,通电后,蛋白质开始根据大小分离(🥨),小分子(zǐ )蛋白质移动得更快,而大分子蛋白质则较慢,通(tōng )过染色(😥)或(huò )西方印迹等方法可以检测和分析(xī )蛋(🔽)白质。
应(yīng )用(yòng )范围广泛,SDS-PAGE不仅用于蛋白质分子量的(de )测定,还广泛应用于蛋白质(🗝)纯(⛑)(chún )化程度的分析、蛋白质变性和复(fù )性(xìng )研究以及蛋白质-蛋(dàn )白质相互(✖)作(zuò )用的研(yán )究,它也是研究蛋白质翻译后修(xiū )饰的重要工具。
尽管SDS-PAGE是一种强大(🏾)的分析工具,但(dàn )它也有局(jú )限性,对于极端(duān )大小的(🗂)蛋白质,分辨率可能(néng )会降低;某些蛋白质可(🎇)能因为结构的特殊(shū )性而在凝胶(🚵)中(zhōng )的迁移不符合预期,在进行SDS-PAGE分析时,通常(cháng )需(🐕)要结合其他生化和分子生物学技(jì )术以获得更准确的结果。
视频本站于2024-10-27 06:10:44收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。