SDS-PAGE凝胶电泳技术
SDS-PAGE凝胶电泳(yǒng ),即聚丙烯(xī )酰(xiān )胺凝胶电泳,是生物化学(xué )和(hé )分(fèn )子生物(wù )学(xué )实验中常用的蛋白质分离和鉴定技(jì )术,这项技(🚭)术的基本(běn )原理是利用蛋白(bái )质在电场中的迁(qiān )移率与其分子量成反比的关(guān )系,通过(guò(🕶) )添加(🌺)阴离子洗涤(📶)剂SDS(十二烷基硫酸钠)使蛋白质带上负电荷(🏤),从(🦁)而消除了蛋(dàn )白(bái )质原有的电荷(hé )差异,使得蛋白质的迁移仅受其大小的影(yǐng )响(xiǎng )。
操(🍺)作步骤方面,首先需(xū )要制(✌)备适当浓度和pH值的聚丙烯酰胺(àn )凝胶,然(📄)后将含有SDS和(🤱)(hé )还原剂的蛋白质样品加入凝胶孔中,通电后,蛋白质开始根据大小分离,小分子(🎀)蛋白质移动(🏨)得更快,而大分子蛋白质则(zé )较慢,通过(guò )染(rǎn )色(🕘)或西方印迹等方法可以检(jiǎn )测和分析蛋白质。
应(yīng )用(yòng )范围广(guǎng )泛,SDS-PAGE不仅用于蛋白质分子量(🥥)的测(cè )定,还广泛应用于蛋白质纯化程度的分析、蛋白质变性和复性研究以及蛋白质-蛋白质(🏰)相互作(〽)用的(💲)研究,它也(yě )是研(yán )究蛋白质翻译后修饰的重要工具。
尽管SDS-PAGE是(shì )一种强大的分析工具,但(🍙)它也有局限性,对于极端大小的蛋白质,分辨率可能会降低;(🐜)某些蛋白质(zhì )可能(néng )因为结构(gò(🍵)u )的特(🌍)殊性而(🈯)在凝胶(jiāo )中的迁移不符合预期,在进行(📡)SDS-PAGE分析时(shí ),通常需要结(jié )合其他生化和分子生物学技术以获(huò )得更准(zhǔn )确的(de )结(📙)果。
视频本站于2024-11-08 06:11:09收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。