SDS-PAGE凝胶电泳技术
SDS-PAGE凝胶电(diàn )泳(🚬),即聚(jù )丙烯酰(xiā(📲)n )胺凝胶电泳,是生物化(huà )学(xué )和分子生物(wù )学实验中(🥛)常用(yòng )的蛋(🔅)白质分离(lí )和(hé )鉴定技术,这项技术的基本(běn )原(yuán )理是(shì )利用蛋白质在电场中的迁移率(lǜ(🚱) )与(🍞)其分子(🛡)量成反比的(de )关系,通过添(tiān )加阴离子(zǐ )洗涤剂SDS(十(📬)二(🤽)(èr )烷基硫酸(suān )钠)使蛋白质(zhì )带上负电荷,从(cóng )而消除了蛋白质原有(yǒu )的电荷差异,使得蛋白质的迁移仅(🍢)受其大小的影响。
操作(zuò )步骤方面,首先需要制备适当浓(nóng )度和pH值的聚丙烯酰胺凝(🤰)胶,然后将含有SDS和还原剂的蛋白质样品加入凝胶孔中,通电后,蛋白质(zhì )开始根据(📆)大小分离,小分子(🖱)蛋白质(zhì(🐪) )移动得更快,而大分子蛋白质则较慢,通过染色或(huò )西方印迹等方法可(kě )以检测(🏒)和分析蛋白(bái )质。
应用范围广泛,SDS-PAGE不仅用于蛋白(bái )质分子(zǐ )量(👨)的测定(dìng ),还广泛应用于蛋白质纯化程度的分析、蛋(⛷)白质变性和(hé )复性研究(jiū )以及(jí )蛋(🏀)白质-蛋白质相互(hù )作(📤)用的研究,它也是研究蛋白质翻译后(🎉)修饰(🚈)的重要工(gōng )具(⛲)。
尽管SDS-PAGE是一种强大的分(fèn )析工(gōng )具,但它也有局限性,对(duì )于极端大小的蛋白质,分辨率可能会降低;某些蛋(🤣)白质可能因为结构的特殊性(xìng )而在凝胶中的(de )迁移(🈳)不符合预期,在进(🔷)行SDS-PAGE分(fèn )析时,通常需要结合其他生化和分子生物(wù )学技术(shù )以获得更(😜)准(zhǔn )确的结果。
视频本站于2024-11-07 06:11:45收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。