SDS-PAGE凝胶电(diàn )泳技术
SDS-PAGE凝胶电泳,即聚丙烯酰胺(🥇)凝(níng )胶电泳,是生物化(huà )学和分子生物学实验中常用的蛋白(👥)质分(fè(🏠)n )离和(🚽)鉴定技术,这项(xiàng )技术的基本原理是利用蛋白质在电场中的(de )迁(qiān )移率与其(qí )分子(zǐ )量成(ché(👢)ng )反比(bǐ )的关(🌤)系,通过添加阴离子洗涤(🌋)剂SDS(十二烷(wán )基硫酸钠)使蛋白质带上(🌲)负电(diàn )荷,从而消除了蛋白质原有的电荷差异,使得蛋白质的迁移仅受其(qí )大小的(de )影响。
操作步骤方面,首(shǒu )先需要(yào )制(zhì )备适当浓度(dù )和pH值的聚丙烯酰胺凝胶,然后将含(hán )有SDS和还原(yuán )剂的(⬜)蛋(dàn )白(😖)质样品加入凝胶(🍝)孔中,通电后(hòu ),蛋(dàn )白质开始根(gēn )据大小分离,小分子蛋白质移动得更快,而大分子蛋白质则较慢(màn ),通过染色或西方印迹等(👘)方法可(kě )以(yǐ )检测和分析蛋(dàn )白质。
应用范围广泛,SDS-PAGE不仅用于蛋白质分子量的测定,还广泛应(⤴)(yīng )用于蛋白质纯(chún )化程(chéng )度的分析、蛋白质变性和复性研究以及(🥛)蛋白质-蛋白质相互作用的研究,它也是研究蛋白质翻(fān )译后修饰的重要工具。
尽(🎮)管SDS-PAGE是一(yī )种强大的分析(xī )工具,但它也有局限(xiàn )性,对于极端大小的(de )蛋白质,分辨率可(🕡)能(néng )会降低;某些蛋白质(zhì )可(🌙)能因为结构的特(tè )殊性而(ér )在(🙎)凝胶中的迁移不符合预期,在进行(🛰)SDS-PAGE分(🎙)析时,通常需要结合其他生化和分子生(shēng )物学技术以获得更准确的结果。
视频本站于2024-10-27 09:10:55收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。