SDS-PAGE凝胶(jiāo )电泳技术
SDS-PAGE凝胶电泳,即(jí )聚丙烯酰胺凝(níng )胶(jiāo )电(😓)泳,是生物化学和分子生物(wù )学(xué )实验中常用的蛋白质分离和鉴定技术,这项技(🤮)(jì )术的基本原(🚈)理是利用蛋白质在电场中(zhōng )的迁移率与其分子(zǐ(🛃) )量成反比的关系,通(tōng )过添(tiān )加阴(yīn )离子洗涤剂SDS(十二烷基硫酸钠)(📐)使蛋(dàn )白质带上负电(diàn )荷,从而(👨)消除了蛋(dàn )白质原(yuán )有的电荷差异,使得蛋白质的(de )迁移仅受其大小的影响。
操(cāo )作步骤方面,首先需要制备适当浓度和(hé )pH值的聚丙烯酰胺凝胶(jiāo ),然后将含有SDS和还原剂(🦌)的蛋(dàn )白质样品(pǐn )加入凝胶(📐)孔中,通电后,蛋白(bái )质开始(shǐ )根(📇)据(jù )大小分离,小分子(💻)蛋白质移动得更快,而大分(fè(👕)n )子蛋(💞)白质则较(jiào )慢,通过染色或西方(🍚)印迹等方法(fǎ )可(kě )以检测(Ⓜ)和分析蛋白质。
应用范围(wéi )广(🦉)泛,SDS-PAGE不仅用于蛋(dàn )白(bái )质分子量的测定,还广泛应(yīng )用于蛋白质纯化(huà )程(ché(📽)ng )度的分析、蛋白质变性和复性研究以及蛋白质-蛋(🐼)(dà(🎌)n )白质相互作用的研究,它也是研究蛋白质翻译后修饰的重要工具。
尽管SDS-PAGE是一种强大的(➖)分(fèn )析工具,但它也有局限性,对于极端大小的(de )蛋白质,分辨(📧)率(lǜ )可(kě )能会降低;某些蛋白质可能因(yī(🏓)n )为结构的特殊性而在凝胶中的迁移(yí )不符合预期,在(zài )进行SDS-PAGE分析时,通常需要结合其他生化和分子生物学技术以获得更(gèng )准确的结果。
视频本站于2024-11-07 12:11:20收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。