SDS-PAGE凝胶电泳技术
SDS-PAGE凝胶电泳,即聚丙烯酰胺凝胶电泳,是生物化学和分子生物学实验中常用的蛋白(bái )质分离和鉴(jiàn )定(dìng )技术,这项技术的基本原(🌉)理是利用蛋白质在电场中的(🔸)迁移率与其分子量成反(fǎn )比的关系,通过(🦇)添加阴离子洗涤剂SDS(十二烷基(🦍)硫酸钠)使蛋白质(zhì(☕) )带上负电荷,从而消除了蛋白(bái )质原(🚑)有的电荷差异,使得蛋白质的迁(qiān )移仅受(🤘)其大(dà(🕹) )小(xiǎo )的影响。
操(cāo )作步骤方面,首先需要制备适(shì )当浓度和pH值的(💲)聚丙烯酰胺凝胶,然(rán )后将含有SDS和还原剂的蛋(dàn )白质样(yàng )品加入凝胶孔中,通电后,蛋白(📺)质开(kāi )始(shǐ )根据大(dà )小分离(lí ),小分(fè(✒)n )子蛋白质移动得更快,而大分(🥦)子蛋白质则较(jiào )慢,通过染色或西方印迹等(🌾)方法可以检测和分析蛋白质。
应用范围广泛,SDS-PAGE不仅用于蛋白质分子量的(de )测定,还广泛应用于(🏑)蛋(👾)白质纯化程度的(de )分析、蛋白质变性和复性研究以及蛋白质(zhì )-蛋(dàn )白质相(xiàng )互作用的研究,它也是(shì )研究蛋白质翻(fān )译后修(🌒)饰的重要工具。
尽(jìn )管SDS-PAGE是一种强大的分(fèn )析工(gōng )具,但它也(yě )有局限性,对于极端大小的蛋白质,分辨率(lǜ )可(kě )能会降(jiàng )低;某些蛋白质可(🕸)能因为结构(gòu )的(de )特殊(shū )性而在凝胶中的迁移不符合预期,在(zài )进行SDS-PAGE分析时(🐋)(shí ),通(🎙)常需要结合其他生(🎬)化和分子(😬)生物学技术以获得更准确的结果。
视频本站于2024-11-01 07:11:54收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。