SDS-PAGE凝胶电泳技术
SDS-PAGE凝胶电泳(yǒng ),即聚丙烯酰胺凝胶电泳,是生物化(🌑)学和分子生物学实验中常用的(🛷)蛋白质分离和鉴定技术,这(zhè )项技术的基本原(yuán )理是利(lì(💯) )用(🏡)蛋(✊)白质(zhì )在电场中的迁移率与其分子量成(chéng )反比的关(📅)系,通过添加(jiā )阴离子洗涤剂SDS(十二烷基硫(🧢)酸钠)使蛋白质带上负电荷,从而消(xiāo )除了蛋白质(zhì )原有的电荷(👨)差异,使(🚆)(shǐ )得(💮)蛋(dàn )白(bái )质的迁移仅受其大小(xiǎo )的影响。
操作(zuò )步骤方(fāng )面(miàn ),首先(🍝)需要制备适当浓度和pH值的聚丙烯(xī )酰胺凝胶,然后将含有SDS和还原剂的蛋白质(🦑)样品加入凝胶孔中,通电(diàn )后,蛋白质(zhì )开(kāi )始根据大小分(fèn )离,小分子蛋白质移动(dòng )得更快,而大分子(🚖)蛋白质则较(jiào )慢,通过染色(sè(😽) )或西方印(yìn )迹等方(🐁)法可以检(jiǎn )测(cè )和(hé )分析(xī )蛋(dàn )白质(zhì )。
应用范围广泛,SDS-PAGE不仅用(🌌)于蛋白(bái )质分子(🍖)量(liàng )的测定(dìng ),还广(guǎng )泛应用于蛋白质纯化程度(dù )的分析、蛋白质变性和复性研究以及蛋白质-蛋白质(zhì )相互作用的研究(jiū ),它也是研究蛋白质翻译后修饰的重要工具。
尽管SDS-PAGE是一种强大的分析工具,但它也有(📝)局(😈)限性,对于极端大小的蛋白质,分辨率可能会降低;某些蛋白质(⏮)可能因为结构的特殊性而在凝胶中的迁移不符(📭)合(hé )预期,在进行SDS-PAGE分析时(shí ),通常需要结(🦉)(jié )合其他生化和(hé )分子生物学技术以获(huò )得更准确的结果。
视频本站于2024-10-28 09:10:26收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。