SDS-PAGE凝胶电泳技术
SDS-PAGE凝胶(🤡)(jiāo )电泳,即聚丙(🈶)烯酰胺凝胶电泳,是生(shēng )物(wù )化学和(🥨)分子(zǐ )生(shēng )物学实验中常用的蛋白质分(fèn )离和鉴定技术,这项技术(shù )的(de )基本原理是利用蛋白质在电场中的迁移率与其分子量成反比的关系,通(🦗)过添加阴离(lí )子(zǐ )洗(🥀)涤剂SDS(十二烷基硫酸钠)使蛋白(bái )质带上(🔺)负电(♌)荷(hé ),从而消除了蛋白质(zhì )原(yuán )有的(de )电荷(hé )差异,使得蛋白质的迁移(🔺)仅(jǐ(🔫)n )受其大小的影响。
操(cāo )作步骤方面,首先需要制备适当浓度和pH值的(de )聚丙烯酰胺凝胶,然后(🥢)将含有SDS和(hé )还原剂的蛋(dàn )白质样品(pǐn )加入(📅)凝胶孔(kǒng )中,通电(diàn )后(hòu ),蛋白(bái )质开始(shǐ )根据大小分离,小分子蛋白(bái )质移动得更快,而(📉)大分子(zǐ )蛋白质则较慢,通过染色或西方印迹等方法可以检测和分(fèn )析蛋白质。
应用(yòng )范围广泛,SDS-PAGE不仅用于蛋白质分子量的测(cè )定,还广泛(fàn )应用于蛋(dàn )白质纯化(huà )程度的分析、蛋白质(zhì )变(🏍)性和复(🍖)性(🐲)研(yán )究以及蛋白质-蛋白质相互作用的研究,它也是研究蛋白质翻译后(hòu )修饰(shì )的重要工具。
尽管SDS-PAGE是(🤓)一种强大的分析工具(jù ),但它(😙)也有局限性,对(🉑)于极端(duān )大小的蛋白质,分辨率可能会降低;某些蛋白质可能因为结(🚂)构的特殊性而在凝胶中的迁移不符合预期,在(🕰)进行SDS-PAGE分析时,通常需(🈯)要结合(😹)其他生化和分子生物学(xué(🌑) )技术以获得更准(⛩)(zhǔn )确的结果。
视频本站于2024-11-01 01:11:14收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。